快繁中几大难题及解决方法 快繁的优点有哪些
植物非试管快繁技术的植物非试管快繁技术生产运用特点
植物非试管克隆技术是一项实用技术,它的运用使中国的快繁产业从实验室开始走向田间,从科研院所及企业的专利走向农家,走向苗圃。是农民用得起的高新农业技术。
(1)植物非试管快繁技术具有技术简单易操作与掌握的特点,极利于作为实用技术在农村普及推广,即使没有专业素质的生产者也可以运用它进行种苗的工厂化生产。
(2)建立基地无特殊要求,只要是有电有水有光照的地方就可建立快繁基地,对土壤气候无特定要求。
(3)投资省,只需投入几万元,就可建立一个年产几十万至上百万株苗的生产基地,而且运作成本极低,一般品种培育成本不会超过1分钱,是传统扦插育苗的1/10~1/20,是组培育苗的1/30~1/50,是生产低成本种苗获取市场竞争力最为有效的育苗方法。
(4)适用于绝大多数植败蔽旁物的快繁,包括用于农林业生产及绿化工程的各种经济植物种苗,如农作物、蔬菜、瓜果、林木、绿化、药材等,是当前适普性最强的育苗技术。
(5)采用计算机控制与育苗专家系统,实现种苗生产过程的自动化智能化,是劳动力成本投入最低的一项育苗技术,也并凯是摆脱传统凭经验育苗走向工厂化科学育苗的一种新技术,生产的种苗整齐度好商品率高。
(6)对离察橡体材料要求不严格,小至一叶一芽大至一个树干的切段都可进行快繁,不像组培与扦插有特殊的要求,灵活性大适用范围广。
(7)在隔离快繁情况下可以利用脱毒苗为母本,进行多代循环,大量生产廉价低成本的脱毒种苗。
(8)用于快繁的计算机控制系统,具有可升级多功能的特点,可以用于温室大棚的环境控制,也可用于智能灌溉,还可用于水培生产及芽苗菜智能化栽培,具有软件升级方便,硬件易于更换容易的特点,是农业生产上难得的一机多用产品。
植物无糖组培快繁技术的技术优势
植物无糖组织培养技术改革了传统的用糖和瓶子作为碳源营养和生存空间的技术方法,增加了植物生长和生化反应所态判需的物质流的交换和循环,促进植株的生长和发育,实现了优质苗低成本的生产。优越如下:
1)通咐滚过人工控制动态调整优化植物生长环境,为种苗繁殖生长提供最佳的CO2浓度、光照、湿度、温度等环境条件,提高植株的光合速率,促进了植株的生长发育,苗齐、苗壮。
2)继代与生根培养过程合二为一,培养周期缩短了40%以上。
3)大幅度减少了植物微繁殖生产过程中的微生物污染率。
4)消除了小植株生理和形态方面的紊乱,种苗质量显著提高。
5)提高了植株的生根率和生根质量,特别是对于木本植物来说,极大地植株的生根率和生根质量,试管苗移栽成活率显著提高。
6)节省投资,降低生产成本。与传统的微繁殖技术相比,种苗生产综合成本平均降低30%(Xiaoetal.,2004;Zobayedetal.,2004)。
7)组培生帆简改产工艺的简单化,流程缩短,技术和设备的集成度提高,降低了操作技术难度和劳动作业强度,更易于在规模化生产上推广应用。
8)培养不受培养容器的限制,可实现穴盘苗商业化生产,也可实现大规模容器自动工厂化生产。
中国兰的组培快繁技术
中国兰又称东洋兰,是兰科兰属中的地生兰,为庞大兰科家族中独特稀少的种属。它芳花清丽,高雅幽香,是我国的传统名花,具有很高的观赏价值和经济价值,其中不乏珍品,千金难求。但传统的分株繁殖,繁殖系数极低,带毒株数多,种性退化。种子中缺乏胚乳和子叶,胚发育不完全,导致常规播种难以萌发。应用组织培养技术,开展快速繁殖是开发和发展中国兰花产业的有效途径。1.中国兰茎尖、侧芽组培技术
(1)采样、消毒与接种
为了尽量减少供样兰花所带病菌,应采取不施有机肥,放置在透光避雨处,当新芽初露时即让幼芽裸露土面等特殊管理措施。切取6~13厘米的新芽(因品种而异取样有差别),用锋利刀片除去根、脏物和外包叶2~3片,充分洗净。
在材料上切取2~3厘米茎顶,在10%次氯酸钠药液中消毒10分钟,若带菌严重,应用0.1%升汞和饱和漂白粉上清液交叉消毒。灭菌后用无菌水冲洗数次,再放到灭菌滤歼燃盯纸上吸干水分,然后在解剖镜下,无菌操作剥取茎尖和腋芽。如以去病毒为目的,所剥取的茎尖应在0.2毫米以下,否则可剥取2毫米以上茎尖,带2个叶原基,以有利于成活。
(2)原球茎的诱导
茎尖的启动率和成功率均高于侧芽。新芽长度的选择无论茎尖或侧芽均以选取9~13厘米长的新芽氏和为佳。新芽诱导的成功率最高。培养基的选择因品种而异,春兰类品种以White+1毫克/升6苄基腺嘌呤+5毫克/升萘乙酸+8.5%椰乳;或B11+1毫克/升6苄基腺嘌呤+2毫克/升萘乙酸的培养基最优。夏惠、秋素等品种则以MS+0.5毫克/升6苄基腺嘌呤+1毫克/升萘乙酸+0.5%活性炭培养基最佳。兰花外植体接种后放置在23~25℃的黑暗条件下培养,1~2个月后可分化1至数个乳白色的原球茎,在解剖镜下观察类似桑果形状的原球突起,以后转绿,再经培养而呈根状茎(或呈树枝状的丛生形)。中国兰经茎尖培养,在原球茎诱导启动后易褐变死亡,死亡率有时高达3/4。因此,应通过采用较大外植体接种,降低培养温度,采用暗培养,减少伤口面,在培养基中添加褐变抑制剂(如聚乙烯吡咯烷酮、硫代硫酸钠、芸香赣、柠檬酸等)或配合应用活性炭等综合措施,以减轻褐变的不利影响。
(3)原球茎的增殖
茎尖、侧芽接种3~6个月后,根状茎形成时即可分割继代,增殖培养基以White或B11为基本培养基,附加1~2毫克/升萘乙酸的液体培养基为宜。放置在慢速转床上加光培养(1~2转/分钟),每隔15天更换一次培养基,连续继代3~4次后,再转入相同成分、附加有活性炭(0.3%)和柠檬酸(500毫克/升)的固体培养基,每月继代一次。液培、固培交替进行。增殖培养中,原球茎的分割不可太小,培养群体不宜太少,培养液不可过多,继代培养时间不可太长。否则,原球茎生长不良,甚至死亡。
(4)成苗和壮苗培养
将原球茎转入B5+2~3毫克/升6苄基腺嘌呤+0.2毫克/升萘乙酸的琼脂培养基上,放置在25℃左右,光强1000勒条件下,不久即可分化芽和根,从而形成完整的小植株。
当苗长至2~3厘米时,应及时转入B5+2毫克/升萘乙酸+0.3%活性炭的培养基中,让根芽能成比例地正常生长。壮苗培养以大试管(30毫米200毫米)为宜,放置在28℃左右,光强2000勒,每天光照12小时的环境中。当苗高12厘米以上,根苗茁壮时即可移栽。
2.兰花无菌播种技术
因兰科植物种子皆缺乏发芽所需要的贮藏养分,人工播种需要在无菌条件下配合适宜的培养基才能萌发。中国兰因种皮阻碍水分及气体通过,并含有阻碍发芽的物质,或因胚活力衰弱等原因,以至无菌播种时萌发或发段圆芽率极低,其中地生兰发芽率最低。因此,要采用无菌播种技术。
(1)种子消毒和预处理
取8~9成熟、尚未爆裂的地生兰蒴果,先用酒精棉擦去果面脏物,用消毒刀片将蒴果剖开,取出种子,用细白布包裹好。浸入无菌水使之吸胀,再用无菌滤纸吸干多余水分,用0.1摩尔/升氢氧化钾溶液预处理5~10分钟(氢氧化钾溶液能软化种皮,去除抑制发芽之化学物质,显著提高地生兰的萌发率),无菌水冲洗3次(操作中用玻棒挤压细白布包,使漂洗充分),无菌滤纸吸干水分后,再放入饱和漂白粉上层清液中消毒10~20分钟,最后用无菌水冲洗数次,即可播种。种子表面消毒以升汞、次氯酸钠和漂白粉效果较好,双氧水较差,升汞对形成原球茎后的生长有不良影响,次氯酸钠、漂白粉则有促进种子萌发和原球茎生长的明显作用。
(2)播种用培养基
通常采用的培养基有Knudson、VacinWent、White、B11等。地生兰种子以B11或White+1毫克/升6苄基腺嘌呤+1毫克/升萘乙酸+0.3%活性炭的培养基为最优。杂交种子则以B11+1毫克/升6苄基腺嘌呤+1毫克/升萘乙酸的培养基为佳。附加萘乙酸能提高兰花种子的萌发率,但萌发后死亡数增加,如与6苄基腺嘌呤配合使用,效果较好。附加活性炭也能大大减少已萌发种子的死亡率,尤其能提高地生兰种子的萌发率。但活性炭对地生兰气生兰的杂交种子萌发却表现出明显的抑制作用。
(3)原球茎培养
兰花种子无菌培养后经暗培养,萌发形成白色原球茎,再发育成绿色原球茎(气生兰呈圆球形,地生兰呈根状)。放在25℃左右的有弱光的地方培养,原球茎若转入White+2毫克/升萘乙酸+5%椰乳+0.2%活性炭的培养基中,可大量增殖。
(4)成苗与壮苗培养
根芽分化以B5+2.5毫克/升6苄基腺嘌呤+0.2毫克/升萘乙酸的培养基效果好。壮苗培养基以B5最优。
(5)试管苗的移栽和养护
兰花试管苗自立能力差,移栽难度大。其移栽养护成功的关键技术是:打开试管塞,炼苗3~4天苗取出后洗净黏在根上的培养基,并尽量少伤根。晾苗后栽植在通气、透水、保湿的介质中。先在高温弱光条件下缓苗6~10天,然后在15~25℃,空气相对湿度80%左右的条件下养护,并注意定期补施营养液。
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